杭州铭特生物科技有限公司

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经营模式: 贸易批发

所在地区: 浙江省  杭州市

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biosharp 超敏ECL化学发光底物

图片审核中 biosharp 超敏ECL化学发光底物
biosharp 超敏ECL化学发光底物

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价格 面议
起批量 ≥1盒
供货总量 999盒
产地 浙江省/杭州市
发货期 自买家付款之日起3天内发货
产品规格
500ml/瓶 面议 999盒可售
总 价: 价格面议 0

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产品详情

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“biosharp 超敏ECL化学发光底物”参数说明

是否有现货: 用途: 实验室试剂
应用: 科学研究 级别: 基准试剂
含量: 标准品 类别: 其它
规格: 500ml 商标: Biosharp
包装:

“biosharp 超敏ECL化学发光底物”详细介绍

biosharp 超敏ECL化学发光底物基本介绍

超敏ECL化学发光底物

品  牌:biosharp

货  号:BL523B

规  格:500ml

biosharp 超敏ECL化学发光底物性能特点

产品特点:

1、灵敏度高:可检测低皮克级的蛋白;

2、信号持续时间长:光信号持续时间长达5小时;

3、稳定试剂:工作液在24小时内保持稳定;

4、成像方法:适用于X射线胶片、CCD或激光凝胶成像仪;

5、价格经济:针对稀释的抗体浓度条件进行了优化,节省抗体:

一抗:以1 mg/mL储存液稀释1:1,000至1:4,000倍

二抗:以1 mg/mL储存液稀释1:2,000至1:5,000倍

6、简单易用:可替代其它公司的ECL发光底物,操作步骤无需进行特别优化;

biosharp 超敏ECL化学发光底物技术参数

使用方法:

1、执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意用HRP标记IgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。

2、 Western Blot 一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液A和B,放入干净容器中混合。建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3、 用镊子取出膜,搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液(0.125mL发光工作液/cm2膜)中,与发光工作液充分接触。室温孵育3分钟,准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应,使用过少的发光工作液不利反应进行,也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。

4、 用镊子夹起膜,搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。

5、 打开X光胶片暗盒,在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western Blot膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖Western Blot膜的保鲜膜固定在暗盒内,蛋白带面向上。

6、 暗房内压X光胶片,分别曝光不同的时间,如数秒到数分钟。显影冲洗。建议第一次曝光 60 秒,之后可调整曝光时间以达到 结果。化学发光反应在底物孵育后的前 5-30 min期间是强烈的。这一反应可以持续几个小时,但强度会随时间下降,如有底物孵育后较长时间后曝光,曝光时间可能需要延长以获得较强信号。      

biosharp 超敏ECL化学发光底物使用说明
用途:用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。

注意事项:

(1)步骤1~5可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。

(2)长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。

(3)发光工作液孵育约3分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使X光胶片曝光。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光,因而弱带可曝光1-10小时。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。

(4)由于超敏发光液极其灵敏,建议按照 比例稀释抗体。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败。

(5)某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。

(6)使用肉眼可见的预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标签可 确定胶片上条带的位置和大小。

(7)叠氮钠是 HRP 的抑制物,不要使用叠氮钠作为缓冲液的 。

保存条件:

  室温运输,4 ℃密封避光保存一年,短期可放置室温。

biosharp 超敏ECL化学发光底物采购须知

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